miRNA全套服务解决方案
分类: miRNA靶点鉴定
发布时间: 2015-04-26 23:08
提供从miRNA筛选到靶点鉴定至最终的动物模型实验一站式服务。公司拥有人类miRNA mimics 及antagomir文库(1000×2),小鼠miRNA mimics及antagomir文库(600×2),大鼠miRNA mimics及antagomir文库(500×2)。这些文库可以应用于大规模高通量筛选,可平行分析成千上万条基因的功能,大大加快研究进程,从而能迅速、全面地鉴定出细胞过程或信号传导途径的相关候选基因,以及疾病相关的药物靶基因,保证研究成 果更为系统、新颖。
服务流程
第一步 接收客户提供的组织或者细胞样本,提取总RNA后,进行生物芯片初级筛选,得到客户感兴趣物种的所有miRNA在该样品中的表达水平图谱。
第二步 从芯片检测结果中挑出表达差异明显的miRNA,在多个组织或细胞样品中进行实时荧光定量PCR检测验证,选定感兴趣的miRNA。
第三步 根据主流预测miRNA目标基因软件pictar和targetscan,预测出该miRNA的目标mRNA,构建这些mRNA表达质粒,与miRNA共转染进细胞后,得到miRNA与目标mRNA的luciferase检测结果。
第四步 根据实验得到的luciferase检测结果,挑出miRNA有作用效果的mRNA,进行mRNA质粒突变以WesternBlot试验。
第五步 对miRNA进行慢病毒包装,侵染进选定的合适细胞系。将侵染好的细胞打入到小鼠体内,进行动物实验。
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