慢病毒稳转过表达细胞系构建
分类: 慢病毒稳转细胞株
发布时间: 2015-04-26 22:40
慢病毒稳转过表达细胞系基于慢病毒表达系统构建。慢病毒系统可非常高效地把基因转染到活体模式生物和几乎所有的哺乳动物细胞中,包括不分化的细胞,不分化细胞处于不活跃或者停止生长的状态,非常难转染,例如神经元细胞、原代细胞、干细胞。将基因ORF装到三种慢病毒表达载体,载体带有可进行高效率的包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组,从而使得外源基因在目的细胞高效表达。
服务内容
步骤 |
说明 |
周期 |
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ORF获取 |
cDNA文库中有的,直接调取 |
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cDNA文库没有的,全基因合成:2.2/bp |
2-3周 |
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慢病毒表达载体构建 |
七种载体可供选择:
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慢病毒包装 |
1x108TU/ml, 200ul |
3-4周 |
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1x108TU/ml,1ml |
3-4周 |
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1x109TU/ml,200ul |
4-5周 |
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1x109TU/ml,1ml |
4-5周 |
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混合克隆筛选 |
流式分选(推荐) |
2-3周 |
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抗生素筛选 |
3-5周 |
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筛选稳定沉默细胞株 |
通过qPCR检测(推荐) |
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通过荧光信号检测 |
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