内容编辑高通量筛选靶基因的miRNA
分类: miRNA文库筛选
发布时间: 2015-04-26 20:28
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已知基因，筛选调控该基因的miRNA。
服务流程
1. miRNA mimics文库构建：现货或客户定制。2. 荧光素酶报告基因载体构建：根据目的基因3‘UTR的长度而定，一般每600-700bp构建一个载体。
3. 筛选：建议使用293T或者Hela细胞系，96孔板筛选。
每个报告基因载体都要将miRNA文库筛选一遍，筛选一个报告基因载体大约需要1-2周。
每孔共转染报告基因质粒，miRNA mimics，内参renilla质粒。以不干扰任何基因的siRNA NC 为阴性参照。
48小时后裂解细胞，使用酶标仪测量luciferase活性。活性降低的为阳性miRNA。
现货文库
人类miRNA模拟体/抑制剂文库（约1000个miRNA）
小鼠miRNA模拟体/抑制剂文库（约600个miRNA）
大鼠miRNA模拟体/抑制剂文库（约500个miRNA）