CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是最新出现的一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。CRISPR是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。在这一系统中，crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与tracrRNA（trans-activating RNA）结合形成双链RNA，此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA达到对基因组DNA进行修饰的目的。在该机制中由小RNA片段识别DNA序列，再由核酸酶对特异DNA序列进行切割，从而使外源入侵的核酸降解。核酸酶Cas9通过gRNA识别DNA序列，对特异DNA序列剪切，从而促使DNA发生NHEJ(nonhomologous end-joining)导致的基因缺失或同源重组，实现基因敲除/敲入。

gRNA介导的CRISPR/Cas9剪切系统

CRISPR/Cas9特点

1. 可对靶基因多个位点或多个基因同时敲除；

2. 载体构建简单，实验周期短，价格低；

3. 已成功应用于大鼠、小鼠、斑马鱼、果蝇、线虫、细菌、水稻、烟草、小麦等多种物种。

CRISPR/Cas9服务

1. 应用CRISPR/Cas9提供动物、细胞的基因敲除/敲入服务，包括小鼠，大鼠，斑马鱼，水稻，小麦等；

2. 应用CRISPR/Cas9提供植物、酵母的基因敲除/敲入服务

参考文献

RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9. Science. 2013 Feb 15 339(6121):823-6.

Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems. Science. 2013 Feb 15 339(6121):819-23.